GD-)和非交换式MBCS(IGD+)。此外，ASCs还可分为PC(CD138+)和浆母细胞(PBS)(CD138-)。依靠sA-seq平台，某些亚群还可以通过其高表达的特定基因来确定，而不是传统的B细胞分类。例如，滤泡B细胞(CD19+CD20+)，GCB细胞(LRMP+CD38+)，活化B细胞(CD71+CD10-Ki67+)和干扰素诱导的B细胞(IFITM1+IFI44L+)。综上所述，不同肿瘤中B细胞亚群的客观多样性和单细胞分析的主观个体化方法共同导致了TIL-B亚群定义的多样性。因此，对符合研究目的的B细胞进行适当而准确的定义，对研究人员提出了更高的生物学知识水平。
三级淋巴结构TLS是位于肿瘤核心或边缘区域的淋巴细胞聚集，主要包括具有FDC的GC和具有成熟DC的T细胞区。TIL-B被APC和TFH细胞诱导分化，介导抗肿瘤功能，实现原位肿瘤破坏(图3)。由于TLS在抗原呈递、激活B细胞、增加细胞因子信号和促进肿瘤相关抗体释放方面的重要性，TLS对免疫反应的作用非常显著。在几项研究中，TLS已被证明与黑色素瘤患者、肺癌患者和乳腺癌患者的生存率呈正相关。有趣的是，肿瘤附近发炎区域的TLSS可能会促进某些癌症的转移和复发。TLS的定位方法主要依赖于H&&&&&&&&E和IHC，包括TLS相关标记物CD19CD20、CD3、DC-LAMP、CXCL13和A-seq为检测TLS的抗肿瘤功能提供了更深层次的洞察力，突出了功能性B细胞亚群及其与其他细胞的合作在结构中产生和维持记忆和效应性抗肿瘤反应的关键作用。
Helmink等人对黑色素瘤新辅助ICB试验队列中的1760个B细胞进行分类，得出结论：TLS的存在与ICB的反应密切相关，可能是总体存活率较高的标志。与无应答者相比，应答者从基线开始有更丰富的B细胞浸润，这具有预测意义。此外，与无应答者相比，应答者的克隆计数和BCR多样性增加。值得注意的是，另一项黑色素瘤队列研究发现，TLS中的T细胞主要是CD4+T细胞，而不是CD8+T细胞，CD8+T细胞经历了抗原呈递并表达了生存分子bcl-2。因此，TLS结合CD8+T细胞的存在可能是预测这些患者的免疫反应和总存活率的最好标记物。
此外，Petitprez等人建立了基于TME的肉瘤免疫分类，发现E级(即免疫群体尤其是B系的高表达)患者对ICB的反应最好，存活率也最高。一个普