了确定受照射肿瘤中PMN-MDSC的逐渐积累是否有助于LLC肿瘤的再生长，或者这种积累是否仅仅是肿瘤生长的结果，使用抗Ly-6G单克隆抗体来消耗MDSC.抗Ly-6G抗体的应用显着降低了肿瘤部位和外周血中PMN-MDSC的频率（P0.05）。此外，用抗Ly-6G抗体治疗大大延迟了照射后的再生，这表明PMN-MDSC的募集对肿瘤再生至关重要。
虽然PMN-MDSCs利用一系列机制来抑制抗肿瘤免疫反应，这涉及到许多免疫细胞和细胞因子，但对CD8+T细胞的抑制无疑是最重要的。为了确定RT后PMN-MDSCs诱导的免疫抑制是否依赖于CD8+T细胞，我们通过流式细胞术评估了CD8+T细胞的数量和功能。
如图3D所示，CD8+T细胞的百分比随着照射从11.71±2.31%下降到2.42±0.62%(P0.01)。PMN-MDSC耗竭逆转了这种下降（RTvs.RT+anti-Ly-6G抗体=2.42±0.62%vs.20.12±3.92%，P0.01）。为了更好地了解CD8+T细胞浸润肿瘤部位的功能状态，我们测量了CD8+T细胞内部和表面上IFN-γ、CD28和PD-1的表达。局部RT显着降低了CD8+T细胞分泌IFN-γ的比例，从33.064.53%降至13.252.08%，并增加了表达PD-1的CD8+T细胞的比例（ctrlvs.RT=253.20±57.03auvs.538.80±98.76）au，P0.05）。CD28表达未观察到显着变化。当抗Ly-6G抗体被给予辐照小鼠时，IFN-γ分泌达到与未处理的LLC小鼠相同的水平（29.74±3.55%），而与辐照小鼠进行比较抗Ly-6G抗体处理后的PD-1表达没有变化小鼠。因此，在这部分我们建议PMN-MDSCs通过抑制CD8+T细胞促进放疗后肿瘤的再生。PMN-MDSCs不仅抑制了TME中CD8+T细胞的数量，而且还抑制了其活性。
为了确定辐照诱导MDSCs的抑制机制，我们进行了免疫组化染色及iN1活性检测。肿瘤切片的免疫组化染色显示，局部RT增强了ARG1的表达，但没有增强iN1活性测定表明，局部照射显著提高了ARG1的活性，从0.400.15UL提高到3.780.39UL((P0.01)。相比之下，NO荧光标记的iNOS活性检测显示，辐照和未处理的肿瘤组织样本的荧光强度相似。
PD-L1的表达是MDSCs的一种新型免疫抑