制机制。然后我们询问PD-L1上调是否是RT后MDSCs介导的免疫抑制的机制之一。通过流式细胞术分析辐照后MDSC中PD-L1的表达。图4E显示，与未处理组相比，受照射肿瘤的MDSC中的PD-L1表达在照射后不久显着增加（照射后第三天：ctrlvs.RT=443.9±175.3auvs.1328.0±324.3au，P0.05）.然而，此后PD-L1表达继续下降，局部照射组在照射后第3周显着低于未治疗组（ctrlvs.RT=1，465.0±399.6auvs.407.5±164.8au，P0.05）。外周血中MDSCs的PD-L1表达与局部肿瘤部位的表达趋势相同。
以上数据表明ARG1表达的上调是照射后PMN-MDSCs抑制功能的合理机制。然而，不涉及PD-L1和iNOS的调节。为了进一步证实这一假设，在辐射后通过灌胃给予ARG1抑制剂nor-NOHA。10mgkgdnor-N1活性从3.780.39UL降低到2.020.25UL（P0.01）。
RT后给予nor-NOHA显着增加CD8+T细胞比例（RTvs.RT+nor-NOHA=2.420.62%vs.6.140.64，P0.01），并伴有肿瘤再生延迟。iNOS抑制剂1400W对肿瘤再生长没有影响。
我们的结果表明，RT通过上调肿瘤内PMN-MDSC的百分比和ARG1活性来促进肿瘤免疫逃避。推测抑制PMN-MDSCs及其ARG1活性可能是一种新的抗肿瘤策略是合理的。越来越多的证据表明，PDE5抑制剂可以抑制TB小鼠和癌症患者MDS1的活性和表达。因此，通过灌胃给予西地那非20mgkgd，以研究它是否可以促进RT的抗肿瘤作用并阐明潜在机制。如图5B所示，正如我们预期的那样，西地那非延迟了照射后的肿瘤再生长，这与阳性对照Nor-NOHA相当。TME的免疫特征表明，当给予西地那非时，肿瘤内PMN-MDSC的比例从38.66±4.24%下降到23.57±2.38%。
此外，西地那非也显着降低了ARG1的表达。为了进一步检查西地那非对MDSC的抑制是否真的导致抗肿瘤免疫增强，我们分析了肿瘤内CD8+T细胞的比例和活性。流式细胞术分析表明CD8+T细胞的百分比从2.42±0.62%增加到7.21±1.22%。
此外，当给予西地那非时，CD8+T细胞分泌的IFN-γ也显着升高。因此，我们证实PDE5抑制剂西地那非通过调节PM